食品中喹诺酮检测的固相萃取方法

一、实验目的

本研究利用固相萃取法作为样品的前处理方法，HPLC法作为检测手段。该方法可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用，操作简便。

二、实验目标物

依诺沙星(CAS：74011-58-8 ),恩诺沙星(CAS：93106-60-6),培氟沙星(CAS：70458-95-6 )，丹诺沙星(CAS：119478-55-6)

三、应用范围

本方法适用于食品中喹诺酮的HPLC检测及确证。

四、参考标准

    推荐性国家标准《GBT 21312-2007 动物源性食品中14种喹诺酮药物残留检测方法》

五、实验材料

   SimplyGreen HLB  必威首页登录平台官网 200mg/6mL。

六、实验方法

   1、样品提取

    称取均质试样5.0ｇ试样（精确至0.001ｇ）于50mL离心管中，加入20ｍＬEDTA Mellvaine缓冲溶液，1000r/min涡旋混合1min，超声提取10min，10000r/min离心5min（温度低于5度），提取三次合并上清液。

   2、SPE柱活化

   净化前用6mL甲醇、6mL水活化。

   3、上样和洗脱

将提取液以2mL/min的速度过柱，弃去滤液，用2mL5%甲醇水溶液淋洗，弃去淋洗液，将小柱抽干，再用6mL甲醇洗脱并收集洗脱液。

   4、重新溶解

    50℃缓慢氮气流条件下吹至近干，用1mL0.2%甲酸水溶液溶解。1000r/min涡旋混合1min，经0.45um有机滤膜过滤后用于上机测定。

   5、HPLC条件

色谱柱：Welch Ultimate XB-C18 (4.6*250mm)

流动相：A乙腈     B[0.1%甲酸的水溶液] 梯度洗脱

表1 梯度洗脱条件

流速：1mL/min

柱温：室温

进样体积:20μl

七、实验结果

1、6ppb牛奶基质中喹诺酮的添加回收结果

表2 6ppb牛奶基质中喹诺酮的添加回收结果

2、    空白样品添加喹诺酮残留物色谱图