GB_T 20361-2006 水产品中孔雀石绿和结晶紫残留量的测定 高效液相色谱荧光检测法

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6.3 净化

将PRS柱安装在固相萃取装置上,上端连接酸性氧化铝必威首页登录平台官网 ,用5mL乙腈活化,转移提取液到柱上,再用乙腈洗茄形瓶两次,每次2.5mL,依次过柱,弃去酸性氧化铝柱,吹PRS柱近干,在不抽真空的情况下,加入3 mL等体积混合的乙腈和乙酸铵溶液(4.13),收集洗脱液,乙腈定容至3 mL,过0.45μm滤膜,供液相色谱测定。.

7测定

7.1色谱条件

7.1.1 色谱柱:ODS-C₁₈柱,250 mmX4.6 mm(内径),粒度5μm。

7.1.2 流动相:乙腈+乙酸铵缓冲溶液(0.125 mol/L,pH4.5)=80+20。

7.1.3 流速:1.3 mL/ min.

7.1.4 柱温:35℃。

7.1.5 激发波长:265 nm。

7.1.6 发射波长:360 nm。

7.1.7 进样量:20 μL。

7.2色谱分析

分别注入20 μL孔雀石绿和结晶紫混合标准工作溶液及样品提取液于液相色谱仪中,按上述色谱条件进行色谱分析,记录峰面积,响应值均应在仪器检测的线性范围之内。根据标准品的保留时间定性,外标法定量。标准品色谱图参见附录A.

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