中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN/T 4138-2015
出口水果和蔬菜中敌敌畏、四氯硝基笨、丙线磷等
88种农药残留的筛选检测
QuEChERS-气相色谱-负化学源质谱法
前言
本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。
请注意本文件的某些内容可能涉及专li。本文件的发布机构不承担识别这些专li的责任。
本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。
本标准起草单位：中华人民共和国山东出入境检验检疫局。
本标准主要起草人：董静、潘玉香、刘文鹏、刘永强、田国宁、孙军、吕建霞、官小明。
1范围
本标准规定了水果和蔬菜中88种农药（见附录A）残留量检测的气相色谱-负化学源质谱筛选检测方法。
本标准适用于胡萝卜、白菜、生姜、苹果、梨、黄桃、草莓、菠菜、西瓜、豇豆、火龙果等蔬菜和水果中88种农药残留量的筛选检测，本标准不适用于橙子等柑橘类水果中灭藻醌残留量的检测。
2规范性引用文件
下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB/T 6682分 析实验室用水规格和试验方法
3方法提要
试样用乙腈（含1%冰醋酸）均质提取，分散固相萃取方法净化，气相色谱-负化学源质谱法测定。基质标准溶液外标法定量。
4试剂和材料
除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的一级水。
4.1乙腈：色谱级。
4.2丙酮：色谱级 。
4.3正已烷：色谱级。
4.4冰醋酸。
4.5无水醋酸钠。
4.6 0.1%醋酸-乙腈溶液：加10 ml冰醋酸到990 mL的乙腈中。
4.7无水硫酸镁：用前在500℃马弗炉内烘5 h，200℃时取出贮存于干燥器中，冷却备用。
4.8 C18吸附剂：40μm~60μm。
4.9乙二胺-N-丙基硅烷（PSA）吸附剂：40μm~60μm。
4.10农药标准物质：标准物质清单见附录A，标准物质纯度≥95%。
4.11农药标准溶液。
4.11.1标准储备溶液：准确称取适量标准品（精确至0.1mg），用丙酮（4.2）溶解，配制成浓度为1 000μg/mL的标准储备溶液，-18℃避光保存，有效期为3个月。
4.11.2混合标准溶液（混合标准溶液A、B、C） ：按照农药性质和保留时间，将88种农药分成A、B、C三个组，本标准对88种农药的分组见附录A。依据每种农药的分组号，移取一定体积的单个农药标准储备溶液于100 mL容量瓶中，A、C组农药用丙酮，B组农药用丙酮+正已烷混合溶剂定容至刻度。混合标准溶液避光4℃保存，可使用1个月。
4.11.3基质混合标准工作溶液：根据需要将混合标准中间溶液用空白基质稀释成适当浓度的基质标准工作液，现用现配。
5仪器和设备
5.1 气相色谱质谱仪：配有负化学离子源（NCI）。
5.2 冷冻离心机；转速≥10000 r/min。
5.3 天平：感量0.1 mg和感量0.01 g。
5.4 均质器。
5.5振荡器。
5.6氮吹仪。
6测定步骤
6.1 提取及净化
取试样可食用部分，粉碎并混合均匀，准确称取10 g（精确至0.01 g），置于100 mL塑料离心管，加入6.0g无水硫酸镁、1.5g醋酸钠、20 mL 0.1%冰醋酸/乙腈溶液，均质提取2 min。以10 000 r/min离心10min。将上层提取液全部转移于旋蒸瓶中，40℃水浴旋转浓缩至近干，再用N2吹干，用乙腈涡混溶解残渣并定容至2.0 mL。于另一塑料离心管中分别称入200 mg C18、150 mg PSA吸附剂，将上述2 mL溶解液转入此离心管中，涡混2 min，5 000 r/min离心3 min。 用一次性注射器取上清液，过0.45μm滤膜，供气相色谱-质谱测定。
6.2 测定
6.2.1气相色谱-质谱参考条件
气相色谱质谱参考条件如下：
a） 色谱柱：RTX-5MS（30m×0.25mm×0.25μm）石英毛细管柱或相当者；
b） 色谱柱温度：50℃保持2 min，先以25℃/min程序升温至170℃，然后以2C/min升温至230℃ ，再以10℃/min升温至280℃ ，保持8 min；
c） 进样体积：1μL；
d） 载气：氦气，纯度≥99.999%，流速1.0 mL/ min；
e） 进样口温度：270℃；
f） 进样方式：不分流进样；
g） NCI源：温度200℃；反应气：甲烷，纯度≥99.999%，流速2.0 mL/ min；
h） GC-MS接口温度：250℃；
i） 测定方式：选择离子监测模式，每种化合物分别选择一个定量离子，1个~3个定性离子。每组所有需要检测的离子按照出峰顺序，分时段分别检测。每种化合物的保留时间、定量离子、定性离子及定量离子与定性离子丰度的比值参见附录B。每组检测离子的开始时间和驻留时间参见附录C。
6.2.2定性测定
进行样品测定时，如果检出的色谱峰的保留时间与标准物质色谱峰保留时间偏差在±0.5%以内，且在扣除背景后，该色谱峰对应的质谱图中出现所选择的离子（离子丰度比与标准物质离子丰度比的偏差不超过表1规定范围），则可以判断样品中存在这种农药。
6.2.3定量测定
为减少基质对定量结果的影响，本方法采用阴性基体样品溶液配制基质混合标准工作溶液，外标法定量测定。标准溶液的浓度应与待测化合物的浓度相近。样品中农药响应值应在基质混合标准工作溶液线性范围内。各种标准物质的气相色谱-质谱总离子流色谱图参见附录D。
6.2.4 平行试验
按以上步骤对同一试样进行平行试验测定。
6.2.5空白试验
除不加试样外，均按上述操作步骤进行。
7结果计算和表达
试样中农药残留量可由色谱数据处理软件计算，或按式（1）计算。
式中：
xi——样品中待测组分残留量，单位为毫克每千克（mg/kg）；
Ai——样液中待测组分定量离子色谱峰的峰面积；
ci——基质标准溶液中农药的浓度，单位为毫克每升（mg/L）；
V——样品定容体积，单位为毫升（mL）；
Asi——基质标准溶液中待测组分定量离子色谱峰的峰面积；
m——最终溶液相当的试样质量，单位为克（g）。
8测定低限和回收率
8.1测定低限
采用本方法对胡萝卜、白菜、生姜、苹果、梨、黄桃、草莓、菠菜、西瓜、豇豆、火龙果11种蔬菜和水果中88种农药残留进行测定，对橙子中除灭藻醌外87种农药残留进行测定，各种农药的测定低限均为0.008 mg/kg。
8.2 回收率
采用本方法对胡萝卜、白菜、生姜、苹果、梨、黄桃、草莓、菠菜、西瓜、豇豆、橙子、火龙果进行添加回收实验，添加水平为0.008mg/kg、0.020mg/kg、0.040mg/kg，各种农药在基质中的添加回收率范围参见附录E。
