中华人民共和国出入境检验检疫行业标准
SN/T 5365-2022
出口植物源性食品中氟唑磺隆和氟吡磺隆残留量的测定
液相色谱-质谱/质谱法
前 言
本文件按照GB/T 1.1-2020《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。
本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。
本文件起草单位：中华人民共和国伊宁海关技术中心、伊犁师范大学、中华人民共和国天津海关工业产品安全技术中心、中华人民共和国成都海关技术中心、中华人民共和国天津海关动植物与食品检测中心。
本文件主要起草人：李芳、粟有志、冯新忠、徐颖洁、王兴磊、周磊、刘俊、肖亚兵、雷红琴、李艳美、罗琼、袁小雯、尚爽、周均、陆平。
1 范围
本文件规定了出口植物源性食品中氟唑磺隆和氟吡磺隆残留量的液相色谱-质谱/质谱测定方法。
本文件适用于菠菜、芹菜、土豆、西红柿、苹果、桃子、葡萄、糙米、小麦、核桃、大米等植物源性食品中氟唑磺隆和氟吡磺隆残留量的检测和确证。
2 规范性引用文件
下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。
GB 2763-2019 食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法
3 术语和定义
本文件没有需要界定的术语和定义。
4 方法提要
样品经乙腈-甲苯（90+10）（v/v）提取、分散固相萃取净化后，液相色谱-质谱/质谱检测，外标法定量。
5 试剂和材料
除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为符合GB/T 6682规定的一级水。
5.1 乙腈：色谱纯。
5.2 乙酸铵：优级纯。
5.3 甲酸：优级纯。
5.4 甲苯：优级纯。
5.5 氯化钠。
5.6 0.1%甲酸-5 mmol/L乙酸铵水溶液：准确移取1.0 mL甲酸（5.3），用水定容至1000 mL；准确称取0.375 g乙酸铵（5.2），加入至定容液中，混匀。
5.7 乙腈-甲苯（90+10）（v/v）：取甲苯（5.4）100 mL，用乙腈（5.1）定容至1000 mL，混匀。
5.8 滤膜：0.22μm，有机系。
5.9 十八烷基硅胶填料（C18 填料）：40μm。
5.10 石墨化碳黑（GCB）：120 mesh ~400 mesh。
5.11 氟唑磺隆标准物质：CAS号145026-88-6。
5.12 氟吡磺隆标准物质：CAS号412928-75-7。
5.13 标准储备溶液：准确称取10 mg（精确至0.1 mg）氟唑磺隆标准物质（5.11）和氟吡磺隆标准物质（5.12），用乙腈分别配制成1 000μg/mL的标准储备液，避光4 ℃保存，有效期6个月。
5.14 中间混合标准溶液：分别吸取适量的标准储备液（5.13），用乙腈稀释，配置浓度均为10μg/mL的中间混合标准溶液，避光4 ℃保存，有效期2个月。
5.15 基质空白溶液：将不同基质的阴性空白样品，按照8.1提取和8.2净化后，得到基质空白溶液。
5.16 基质匹配工作溶液：根据需要用基质空白溶液（5.15）稀释中间混合标准溶液（5.14）至合适浓度的基质匹配工作溶液，现配现用。
6 仪器和设备
6.1 液相色谱-质谱/质谱仪：配有电喷雾离子源（ESI）。
6.2 分析天平：感量分别为0.1 mg和0.01 g。
6.3 组织捣碎机。
6.4 振荡器。
6.5 离心机：8 000 r/min。
6.6 离心管：50 mL和2 mL。
6.7 涡旋器。
7 试样制备与保存
蔬菜、水果的取样部位按照GB 2763-2019的规定执行，取样品500 g，用组织捣碎机均质，充分混匀，均分为2份，装入洁净的容器，密封并标明标记，于-18℃以下冷冻保存。
坚果样品去壳取全果500 g，用组织捣碎机均质，充分混匀，均分为2份，装入洁净的容器，密封并标明标记，于0℃~4℃条件下保存。
谷物类样品取代表性试验500 g，粉碎后使其全部可通过425μm 的标准网筛，均分为2份，装入洁净的容器，密封并标明标记，于0℃~4℃条件下保存。
8 测定步骤
8.1 提取
8.1.1 蔬菜、水果
称取5 g试样（精确至0.01 g）于50 mL离心管中，加入5 mL水涡旋30 s，加入10 mL乙腈-甲苯（90+10） （v/v），水平振荡20 min，加入4 g氯化钠（5.5），水平振荡5 min，8 000 r/min离心5 min，取上清液1.0 mL于2 mL离心管，待净化。
8.1.2 谷物、坚果
称取2.5 g试样（精确至0.01 g）于50 mL离心管中，加入7 mL水涡旋30 s，加入10 mL乙腈-甲苯（90+10） （v/v），水平振荡20 min，加入4 g氯化钠（5.5），水平振荡5 min ，8 000 r/min离心5 min，取上清液1.0 mL于2 mL离心管，待净化。
8.2 净化
蔬菜、水果的待净化上清液中加入C18 填料（5.9）50 mg、石墨化碳黑GCB（5.10）30 mg，涡旋30 s，8 000 r/min离心2 min，上清液过0.22 μm 滤膜，滤液待测。
谷物、坚果的待净化上清液中加入C18 填料（5.9） 50 mg，涡旋30 s，8000 r/min离心2 min，上清液过0.22 μm 滤膜，滤液待测。
8.3 测定
8.3.1 液相色谱条件
液相色谱参考条件如下：
a） 色谱柱：C18柱，2.1 mm×100 mm，3μm 或相当；
b） 流动相A：0.1%甲酸-5mmol/L乙酸铵水溶液（5.6）；流动相B：乙腈；洗脱梯度见表1；
c） 柱温：30℃；
d） 进样体积：10μL。
表1流动相及梯度洗脱程序
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时间min
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流速/（μL/min）
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流动相A%
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流动性B%
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0.00
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250
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90.0
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10.0
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1.00
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250
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90.0
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10.0
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1.50
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250
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50.0
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50.0
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5.50
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250
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10.0
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90.0
|
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5.60
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250
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90.0
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10.0
|
|
10.00
|
250
|
90.0
|
10.0
|
8.3.2 质谱条件
质谱参考条件如下：
a） 电离方式：电喷雾电离（ESI）；
b） 干燥气温度：300℃；
c） 干燥气流量：9.0 L/min；
d） 鞘气温度：250℃；
e） 鞘气流速：11.0 L/min；
f） 毛细管电压：4 kV；
g） 扫描方式：正离子扫描。
定性离子对、定量离子对、碰撞能量、碎裂电压等条件见表2。
8.4 定性测定
按照上述条件测定样品和混合基质标准工作溶液，如果待测样品中化合物色谱峰的保留时间与标准溶液相比变化范围应在±2.5%之内，定性离子均出现且信噪比大于等于3，定性离子对的相对丰度与浓度相当混合基质标准工作液的相对丰度一致，相对丰度偏差不超过表3的规定，可判断样品中存在相应的被测物。
表3 定性时相对离子丰度的最大允许范围
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相对丰度
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＞50
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＞20~50
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10~20
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≤10
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允许偏差
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±20
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±25
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±30
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50
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8.5 定量测定
根据试样中被测物的含量，选择浓度相近的基质匹配工作溶液，待测物的响应值在仪器检测的线性范围内，如果待测物含量超过标准曲线范围，应用基质空白溶液稀释到合适浓度后分析。在上述仪器条件下，氟唑磺隆和氟吡磺隆的多重反应监测色谱图参见附录A 中图A.1~图A.2，保留时间亦可参照附录A 中图A.1~图A.2。
8.6 空白试验
除不称取试样外，均按上述步骤操作。
9 结果计算和表述
试样中氟唑磺隆和氟吡磺隆的残留量按式（1）计算，计算结果需扣除空白值。
式中：
X ——试样中被测物的含量，单位为微克每千克（μg/kg）；
c ——待测组分相应值在标准曲线上计算得到的浓度，单位为纳克每毫升（ng/mL）；
V ——提取液的体积，单位为毫升（mL）；
m ——样品称样量，单位为克（g）；
1 000——换算系数。
计算结果保留两位有效数字。
10 定量限
本方法氟唑磺隆和氟吡磺隆的定量限均为5.0μg/kg。
11 回收率和精密度
本方法对波菜、芹菜、土豆、西红柿、苹果、桃子、葡萄、糙米、小麦、核桃、大米等基质进行添加回收率试验，不同添加浓度范围内氟唑磺隆和氟吡磺隆的回收率资料参见附录B。
