中华人民共和国国内贸易行业标准
NY/T 3410-2018
畜禽肉和水产品中呋喃唑酮的测定
Determination of furazolidonein meat of livestock，
poultry and aquatic products
前言
本标准由中华人民共和国商务部提出。
本标准由商务部屠宰技术鉴定中心负贵起草，中国疾病预防控制中心营养与食品安全所、河北省疾病预防控制中心参加起草。
本标准主要起草人：周琛、金社胜、杨祖英、宋书锋、韩会新、张新玲、刘虎成、王贵际。
本标准委托商务部屠宰技术鉴定中心负贵解释。
1范围
本标准规定了畜禽肉和水产品中呋喃唑酮的测定方法。
本标准适用于畜禽肉和水产品中呋喃唑酮的检验。
2原理
样品中呋喃唑酮用二氯甲烷提取，经无水硫酸钠柱净化，用正己烷去脂肪后，0.45μm微孔滤膜过滤，滤液进行HPLC分析。
3试剂与试液
以下所用试剂，除特殊说明外，均为分析纯试剂，水为重蒸水。
3.1乙腈：优级纯，作流动相用。
3.2乙腈：色谱纯。
3.3乙腈水溶液：乙腈+水（80+ 20，V/V）。
3.4 正己烷。
3.5甲醇：色谱纯。
3.6无水硫酸钠：经650℃灼烧4 h后，贮于密闭容器中备用。
3.7无水硫酸钠柱：6 cm×1.8 cm，内装5 cm高的无水硫酸钠（如果无合适的玻璃柱，可以用10 mL注射器代替）。
3.8 二氯甲烷。
3.9磷酸。
3.10呋喃唑酮标准品：纯度99.7%。
3.11 呋喃唑酮标准储备液：称取10.0 mg呋喃唑酮，用乙腈水溶液（3.3）溶解并稀释定容至50 mL棕色容量瓶中，保存于冰箱中。该液1.0 mL相当于200 μg呋喃唑酮。
3. 12呋喃唑酮标准工作液系列：精确吸取呋喃唑酮标准储备液2.0 mL于50 mL棕色容量瓶中，加水至刻度，摇匀.即得8.0μg/mL的溶液，然后精确吸取此液0.05，0.10，0.20，0.50，1.0，2.0 mL，分别放在10.0 mL棕色容量瓶内，分别加水至刻度，据匀，即得每毫升含0.04，0.08，0.16，0.40，0.80，1.60μg的标准系列溶液。
4仪器和设备
4.1高效液相色谱仪：附紫外检测器。
4.2 超声波清洗器。
4.3 旋涡混匀器。
4.4 离心机。
4.5 旋转蒸发仪。
4.6 微量进样器：25μL。
5测定步骤
5.1提取与净化
取200 g试样绞碎，称取混勾的绞碎的试样10g（精确至0.01 g），于100 mL具塞锥形瓶中，加25mL二氯甲烷，超声提取5min，提取液通过无水硫酸钠柱滤入100mL蒸发瓶中，继用25mL二氯甲烷重复提取一次，均通过无水硫酸钠柱滤入同一蒸发瓶中，用二氯甲烷15 mL淋洗无水硫酸钠柱。淋洗液合并于同一蒸发瓶，滤液于旋转蒸发仪上蒸发至干（水浴温度为30℃~35℃）。
然后准确加入1.0 mL乙腈水溶液和1.0 mL正己烷于旋涡混匀器上混匀2 min，转入5 mL离心管中，3 000 r/min离心2 min后（鳗鱼需离心10 min），用吸管移去上层正己烷层，再向离心管中加入1 mL正己烷，混匀2 min，离心，用吸管移去上层正己烷层，下层清液通过0.45μm微孔滤膜过滤，滤液供HPLC分析用。
5.2 色谱测定
5.2.1液相色谱参考条件
a）色谱柱：Hypersil ODS2 C18，250 mm×4.6 mm，粒径5μm；
b）流动相：乙腈+水（40+60），每1 000 mL加1.0 mL磷酸；
c）流速：1.0 mL/ min；
d）检测波长：365 nm；
e）柱温：室温。
5.2.2呋喃唑酮标准曲线的制备
依照上述色谱条件，分别进标准工作液各个点。每个标准液进20 μL，测定其峰面积，然后以标准液浓度对峰面积作校准曲线，求出回归方程及相关系数。
5.2.3样品测定
在上述色谱条件下，准确吸取20μL试样溶液，进行HPLC分析。
6结果
6.1计算
将标准曲线各点的浓度与对应的峰面积进行回归分析，然后按式（1）计算供试样品中呋喃唑酮的含量。
式中：
X——样品中含有呋喃唑酮的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；
c——被测液中相当于标准曲线的呋喃唑酮，单位为微克每毫升（μg/mL）；
V——被测液的体积，单位为毫升（mL）；
m——样品质量，单位为克（g）。
6.2检出限
本方法的检测限为0.01μg/mL，当取样量为10 g时，最低检测量为1.01μg/kg。
7允许差
同一分析者同时或相继两次测定结果之差不得超过均值的15%。
