猪肉中沙丁胺醇，克伦特罗，莱克多巴胺等8种β-激动剂的测定 LC-MS/MS法

(1)  样品信息




 

(2) 样品前处理方法

2.1样品酶解处理

准确称量2g猪肉基质(精确到0.01g)于50mL离心管中，加入0.2mol/L乙酸铵缓冲液(pH＝5.2)6.0mL，再加入β-盐酸葡萄糖醛苷酶-芳基硫酸酯酶50μL，涡旋混匀，于37℃下避光水浴振荡16h。

2.2提取

酶解后放置至室温，涡旋混匀，8000r/min高速离心8min，倾出上清液于另一50mL离心管，用10mol/L 氢氧化钠溶液调pH至9.8±0.2，加入乙酸乙酯10mL，涡旋混匀，5000r/min离心5min，取上层有机相至另一50mL离心管内，再用乙酸乙酯10mL重复萃取一次，合并有机相，50℃下氮气吹干，用2%甲酸水溶液5mL充分溶解，备用。

2.3净化处理

1) 取4支MCX固相萃取小柱(150mg/6mL)，4支PCX小柱(150mg/6mL)，并编号。置于QdauraTM卓睿全自动固相萃取仪中，并把上述提取液全部转移至上样管中。

2) 设定萃取程序如下：6mL甲醇，6mL 2%的甲酸水活化小柱(流速2mL/min)，上样管中样品全部上样(流速0.5mL/min)。分别依次用2%的甲酸水溶液，甲醇各6mL淋洗固相萃取小柱(流速2mL/min)。淋洗完毕后通入空气抽干小柱。最后用4%的氨化甲醇6mL洗脱小柱，收集(流速0.5mL/min)。

3) 将洗脱液在50℃下用氮气吹干，残渣用含定容溶液(10%的甲醇水)定容到1mL，充分溶解，并用0.2μm滤器过滤。

(3) 色谱条件

流动相：A：0.1%甲酸的水溶液  B：0.1%甲酸的乙腈溶液

流 速：0.2mL/min    进样体积：5μL

色谱柱：Venusil® MP C18  2.1×150mm，5μm，100Å

质谱仪：API 4000+

离子源：电喷雾(ESI)，正离子模式

扫描方式：多反应监测(MRM)

(4) 实验结果

4.1 猪肉基质0.5ppb加标实验结果：                4.2 猪肉基质5ppb加标实验结果：


 

4.3 实验结论：

对于猪肉基质样品，PCX与MCX对8种激动剂的回收率相当；因为没有内标校准，回收率结果相对偏低。

(4) 订货指南