315晚会上,央视曝光动物体内的兽药残留问题。记者看到,济南市章丘区永良獭兔养殖场负责人李老板在给兔子拌饲料时,还要再添加一种黄色粉末状物质。而这种物质即喹乙醇。
喹乙醇又称喹酰胺醇,商品名为倍育诺、快育灵,化学名为:2-[N-2-羟基-乙基]-氨基甲酰-3-甲基-喹恶啉-1,4-二氧化物,分子式为:C12H13N3O4,是以邻硝基苯胺为原料合成的一种**促生长剂,因其具有良好的广谱**效果和提高畜禽饲料消化率、促生长作用而被广泛应用于兽药及饲料添加剂中。但近些年来,很多学者对喹乙醇的毒性重新做了深入系统的研究与评价,认为它是一种基因毒剂和生殖诱变剂,有致突变、致畸作用,并且在动物体内会产生蓄积毒性,可通过食物链间接地对人体健康构成威胁,国家规定饲料中喹乙醇限量应在50~100g/吨。因此,对饲料及饲料添加剂中喹乙醇的检测非常有必要。
《饲料中喹乙醇的测定 高效液相色谱法(GB/T
8381.7-2009)》,部分内容节选。
1 范围
本标准规定了以高效液相色谱测定饲料中喹乙醇的方法。
本标准适用于配合饲料、浓缩饲料和添加剂预混合饲料中喹乙醇的测定,最低定量限为1 mg/kg,检出限为0.1 mg/kg。
2 规范性引用文件
下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件,其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准,然而,鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件,其最新版本适用于本标准。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法(GB/T 6682—2008,ISO 3696:1987,MOD)
3 原理
试样中的喹乙醇以甲醇溶液提取,固相萃取小柱净化,反相液相色谱柱分离测定,紫外检测器检测,外标法定量分析。
4 试剂和溶液
除非另有规定,在分析中仅使用确认为分析纯的试剂和符合GB/T 6682规定的三级用水。
警告——喹乙醇对光敏感,应避光操作及使用棕色容器。
4.1 甲醇(色谱纯)。
4.2 提取液:甲醇+水=5+95。
4.3 高效液相色谱流动相:甲醇和超纯水(采用二元梯度)。
4.4 淋洗液1:0.02 mol/L盐酸。移取1.67 mL盐酸定容至1000 mL。
4.5 淋洗液2:0.1 mol/L盐酸。移取8.33 mL盐酸定容至1000 mL。
4.6 淋洗液3:甲醇+水=5+95。
4.7 洗脱液:甲醇+水=40+60。
4.8 喹乙醇标准储备液:准确称取喹乙醇标准品0.05020 g(含量≥99.6%),于50 mL棕色容量瓶中,超声溶解,冷却至室温,定容至刻度,摇匀,使其溶液浓度为1 mg/mL,储存于—18℃冰箱中,可使用一个月。
4.9喹乙醇标准工作液:准确标储备液4.8于容量瓶中,,用洗脱液4.7稀释,依次配置成浓度为0.1ug/ml,1.0ug/ml,5ug/ml,10ug/ml,20ug/ml;50ug/ml,100ug/ml的标准溶液,现配使用。
5.仪器:
5.1离心机:3500r/min
5.2摇床:摇速可达110r/min
5.3螺口离心管:50ml
5.4超声波清洗器
5.5微孔有机相滤膜
5.6固相萃取小柱:Oasis HLB 1ML,30mg或性能相当者
5.7固相萃取仪
5.8恒温振荡器
6 试样制备
选取具有代表性的饲料样品至少500g,四分法缩减至100g.,磨碎,
全部通过0.42mm孔径筛,混匀,装入密闭容器中,避光低温保存,备用。
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相关仪器耗材
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型号规格
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厂家
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离心机
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TG16-W
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湘立
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摇床
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IKA
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螺口离心管
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50ML,100/pk
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SimplyLab
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超声波清洗器
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KQ3200DB
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昆山舒美
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微孔有机相滤膜
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45mm,0.22um,100/pk
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SimplyLab
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针头过滤器
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有机系13mm,0.22um,100/pk
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SimplyLab
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固相萃取小柱
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SimplyGreen HLB,1ML/30mg,100/pk
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SimplyLab
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固相萃取仪
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12位
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国产
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喹乙醇标准品
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甲醇中喹乙醇溶液标准物质,有证书,1mL
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国产
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C18色谱柱
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Simpsil 250*4.6mm,5um
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SimplyLab
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附:喹乙醇代谢物相关耗材:
喹乙醇代谢物免疫亲和柱
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柱容量200ng
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水产、畜禽组织
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1mL
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喹乙醇代谢物ELISA试剂盒
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灵敏度1μg/kg
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水产、畜禽组织、乳品
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96T/盒
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喹乙醇代谢物相关国标:农业部781号公告-3-2006 动物源食品中3-甲基喹噁啉-2-羧酸和喹噁啉-2-羧酸残留量的测定高效液相色谱法://www.alexfarina.com/enstyle/file.html
检测3-甲基喹噁啉-2-羧酸和喹噁啉-2-羧酸检测用固相萃取小柱推荐:SimplyGreen
MAX, 60mg/3ml,50/pk,货号:SG02-06003